Hoe om `n proteïen te denatureer

U mag dalk `n proteïen vir `n wetenskapprojek benadeel, of u het dalk oor gedenatureerde kosse gelees en wil weet hoe hulle werk. Denaturering is die proses waardeur `n proteïen sy vorm en struktuur verloor as gevolg van optrede van eksterne kragte wat hitte, sure en oplosmiddels insluit. Die presiese manier waarop jy `n proteïen denatureer, hang af van die spesifieke proteïen waarmee jy wil werk, aangesien hulle almal verskillende denatureringsmiddels op verskillende vlakke benodig. Die meeste proteïene kan egter gedenatureer word as jy weet wat om in die proteïenomgewing te verander.

stappe

2

Dien alkohol toe. Alkohol onderbreek die waterstofbindings wat tussen die amiedgroepe voorkom. Wanneer `n proteïen aan `n alkoholoplossing blootgestel word, vorm die alkoholmolekules nuwe bindings met die proteïenketting. Gebruik `n 70% alkohol oplossing om die selwand van die bakterieë af te breek en die proteïen te denatureer.

3

Verander die pH. Die interne struktuur van `n proteïen kan ontbind word as die omgewing baie suur of baie alkalies is, aangesien dit die ioonbindings wat die soutbrug van die proteïen bymekaar hou, onderbreek. Voeg `n suur of basiese oplossing vir die proteïen by. Die omgewing moet teen `n pH hoër as 10 of laer as 4 wees om denaturasie te bevorder.

4

Toets met swaarmetaal soute. Swaar metale kan die bindings in die proteïen verander, wat veroorsaak dat dit sy struktuur verloor. Die soute van swaar metale soos kwik en lood kan gebruik word om verskeie proteïene te denatureer. Hierdie soute is by die meeste chemiese verskaffers beskikbaar, en moet altyd met omsigtigheid en met toepaslike veiligheidstoerusting, insluitend handskoene en oogbeskerming, gebruik word.

2

Elimineer die denatureringsfaktor. Keer die omgewing van die proteïen terug na stasis en skakel die denatureringselement uit. Verwyder byvoorbeeld die suur of basis, of herproduseer die proteïen teen `n meer redelike temperatuur.

3

Gebruik `n renaturasie kit. Baie laboratoriumverskaffingsmaatskappye verkoop naturalisasie kits wat jou toelaat om die beste parameters te kies om die renaturasie aan te moedig. Hierdie kits kan veral nuttig wees as jy met proteïene in `n laboratorium of in `n eksperimentele omgewing werk.