dmylogi.com

Hoe om `n spektrofotometrie te doen

`N Spektrofotometrie is `n eksperimentele tegniek wat gebruik word om die konsentrasie van `n opgeloste stof in `n bepaalde oplossing te meet en die hoeveelheid lig wat daardeur geabsorbeer word, te bereken. Hierdie tegniek is kragtig omdat sekere verbindings verskillende golflengtes van lig met verskillende intensiteite sal absorbeer. Deur die lig te analiseer wat deur die oplossing gaan, kan jy die betonstof wat in die oplossing opgelos is, identifiseer en wat is die konsentrasie van hierdie stowwe. `N Spektrofotometer is die toestel wat gebruik word om die oplossings in `n navorsingslaboratorium te analiseer.

stappe

Deel 1
Berei die monsters voor

Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 1
1
Skakel die spektrofotometer aan. Die meeste spektrofotometers moet verhit word voordat hulle akkuraat gelees kan word. Skakel die toestel aan en laat dit vir minstens 15 minute loop voordat dit gebruik word om monsters te lees.
  • Maak gebruik van die opwarmtyd om die monsters voor te berei.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 2
    2
    Maak die kuvette of proefbuise skoon. As jy `n laboratoriumpraktyk vir die skool doen, kan jy weggooibare proefbuise gebruik wat nie skoongemaak hoef te word nie. As jy herbruikbare kuvette of proefbuise gebruik, maak seker dat hulle deeglik skoongemaak word voor elke gebruik. Spoel elke kuvette versigtig met gedeïoniseerde water.
  • Hanteer die emmers versigtig, aangesien dit redelik duur kan wees,
  • Wanneer jy `n emmer hanteer, vermy die kante waarmee die lig sal slaag (gewoonlik die deursigtige kante van die houer).
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 3
    3
    Gooi die toepaslike hoeveelheid monster in die emmer. Sommige kuvette het `n maksimum volume van 1 milliliter (ml), terwyl die proefbuis `n maksimum volume van 5 ml kan hê. Terwyl die laser wat die lig produseer, deur die vloeistof gaan en nie `n leë deel van die houer is nie, sal jy streng lees.
  • As jy die monsters met `n pipet gooi, moet jy seker maak dat `n nuwe een vir elke monster gebruik word om kruisbesmetting te vermy.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 4
    4
    Berei die beheeroplossing voor. Die beheersoplossing bevat slegs die chemiese oplosmiddel waarin die opgeloste oplosmiddel opgelos word. Byvoorbeeld, as u sout in water oplos, sal die beheer oplossing net water wees. As jy die water rooi gekleur het, moet die beheer ook rooi wees. Dit moet dieselfde volume hê as die oplossing wat ontleed moet word en in dieselfde tipe houer gestoor word.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 5
    5
    Maak die buitekant van die emmer skoon. Voordat jy die kuvette in die spektrofotometer plaas, maak seker dat dit so skoon as moontlik is om inmenging deur stofdeeltjies of vuil te voorkom. Gebruik `n weefsel doek met anti-lint behandeling, verwyder enige oorblywende druppels vloeistof of stof wat op die buitekant van die kuvette voorkom.
  • Deel 2
    Doen die eksperiment

    Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 6
    1
    Kies en bepaal die golflengte van lig waarmee die monster geanaliseer kan word. Gebruik `n unieke liggolflengte (monochromatiese kleur) om die eksperiment meer effektief te maak. Die gekose kleur moet een wees wat bekend is om een ​​van die chemikalieë wat vermoedelik in die opgeloste stof van die monster is, te absorbeer. Stel die verlangde golflengte volgens die spesifikasies van die spektrofotometer.
    • As jy in die skoollaboratorium is, sal hulle waarskynlik jou vertel wat golflengte moet instel.
    • Aangesien die monster al die lig van dieselfde kleur sal weerspieël, moet die golflengte van die eksperiment altyd `n ander kleur wees as dié van die monster.
    • Voorwerpe lyk soos sekere kleure omdat hulle die lig van sekere golflengtes weerspieël en al die ander kleure absorbeer. Die gras is groen omdat die chlorofil dit bevat weerkaats groen lig en absorbeer alles anders.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 7
    2


    Kalibreer die toestel met behulp van die monsteroplossing. Plaas die monsteroplossing in die monstervak ​​en maak die deksel toe. In `n analoog spektrofotometer sal daar `n skerm wees met `n naald wat beweeg volgens die intensiteit van die ligdeteksie. Wanneer die monster binne is, moet jy sien dat die naald regs beweeg. Teken die waarde op, indien u dit later nodig het. Met die beheeroplossing wat nog in die masjien is, pas die naald na nul met die verstellingsknop.
  • Die digitale spektrofotometers kan op dieselfde manier gekalibreer word, behalwe dat hulle `n digitale leeswerk sal gee. Pas die beheeroplossing aan op 0 met behulp van die aanpassingsknoppies.
  • Wanneer u die monster verwyder, moet die kalibrasie gehandhaaf word. Wanneer die res van die monsters gemeet word, sal die absorbansie van die beheeroplossing outomaties afgetrek word.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 8
    3
    Verwyder die beheer oplossing en kyk na die kalibrasie. Sodra die monster verwyder is, moet die naald by nul bly of die digitale lesing moet nul bly. Stuur die beheer oplossing na die toestel en maak seker dat daar geen veranderinge in die naald of lees is nie. As die toestel goed gekalibreer is met die beheersoplossing, moet alles op nul bly.
  • As die naald of lees nie nul is nie, herhaal die stappe van die kalibrasieproses met die beheeroplossing.
  • As jy steeds probleme het, soek hulp of neem die toestel na om te kyk.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 9
    4
    Meet die absorpsie van jou monster. Verwyder die beheer oplossing en plaas die monster van die eksperiment in die apparaat. Wag ongeveer 10 sekondes totdat die naald stabiliseer of totdat die digitale nommers ophou om te verander. Registreer die% transmittansie- of absorbanswaardes.
  • Hoe meer lig wat oorgedra word, hoe minder lig word deur die monster geabsorbeer. As `n algemene reël is dit maklik om absorberingswaardes op te teken, wat gewoonlik desimale is, soos 0.43.
  • Herhaal die lesing vir elke individuele monster minstens drie keer en bereken die gemiddelde van die lesings. So jy kan `n meer akkurate leeswerk kry.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 10
    5
    Herhaal die monster met die verskillende golflengtes van lig. Die monster kan veelvuldige onbekende verbindings hê, waarvan die absorbans volgens die golflengte sal wissel. Om onsekerhede uit te skakel, herhaal die lesings met tussenposes van 25 nm oor die spektrum. Dit sal jou toelaat om ander chemiese komponente op te spoor wat jy vermoed ook teenwoordig is.
  • Deel 3
    Analiseer die absorbansdata

    Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 11
    1
    Bereken die transmittansie en absorbans van die monster. Die transmittansie meet hoeveel lig dit deur die monster geslaag het en bereik die spektrofotometer. Die absorbeer meet hoeveel lig geabsorbeer is deur een van die chemikalieë wat in die opgeloste stof voorkom. Baie moderne spektrofotometers toon beide transmittansie en absorbans, maar as jy die intensiteit aangeteken het, kan jy daardie waardes bereken.
    • Die transmittansie (T) word gevind deur die intensiteit van die lig wat deur die monsteroplossing geslaag het, te verdeel waardeur dit deur die beheeroplossing geslaag het. Dit word gewoonlik as `n desimale of persentasie uitgedruk. T = I / I0 waar l die intensiteit van die monster is en l0 is die intensiteit van die beheer oplossing.
    • Die absorbansie (A) word uitgedruk as die negatiewe van die basis-10 logaritme (eksponent) van die transmittansie waarde: A = -log10T. Vir `n T-waarde van 0.1, is die waarde van A 1 (0,1 is 10 verhoog tot -1), wat aandui dat 10% van die lig oorgedra word en 90% geabsorbeer word. Vir `n waarde van 0.01, is die waarde van A 2 (0,01 is 10 verhoog tot -2), dit wil sê 1% van die lig word oorgedra.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 12
    2
    Verteenwoordig absorbanswaardes teenoor golflengtewaardes in `n grafiek. Die absorbanswaarde word op die vertikale as aangebied, en in vergelyking met die liggolflengte wat vir `n spesifieke eksperiment op die horisontale as x gegee word. Die maksimum absorpsiewaardes vir elke golflengte getoets word, toon die absorbansspektrum van die monster en identifiseer die verbindings wat die steekproefstof en sy proporsies vorm.
  • Die absorpsiespektrum het gewoonlik pieke by sekere golflengtes wat kan help om spesifieke elemente te identifiseer.
  • Prent getiteld Doen spektrofotometriese analise Stap 13
    3
    Vergelyk die grafiek van die absorbsiespektrum met die bekende rame vir spesifieke elemente. Elke verbinding het `n unieke spektrum van absorbansie en sal altyd `n piek by dieselfde golflengte lewer wanneer dit gemeet word. Deur die grafiek van onbekende elemente met die bekende verbindings te vergelyk, kan u die opgeloste stowwe in die oplossing identifiseer.
  • U kan ook hierdie metode gebruik om moontlike kontaminante in u monster te identifiseer. As jy op `n spesifieke golflengte wag vir `n duidelike piek en jy kry twee pieke in twee verskillende lengtes, sal jy weet dat iets nie reg in die steekproef is nie.
  • Dinge wat jy nodig het

    • `n spektrofotometer
    • `n stof in oplossing wat ontleed moet word
    • `n addisionele oplosmiddel (vir die beheer oplossing)
    • houers vir monster- en beheeroplossings (kuvette, proefbuise ...)
    Deel op sosiale netwerke:

    Verwante
    Hoe om Mike te trek uit `Monsters, Inc.`Hoe om Mike te trek uit `Monsters, Inc.`
    Hoe om Sully van Monsters Inc te tekenHoe om Sully van Monsters Inc te teken
    Hoe om monsters onder die bed uit te skakelHoe om monsters onder die bed uit te skakel
    Hoe om tuisgemaakte stroke te maak om die vlak van PH te meetHoe om tuisgemaakte stroke te maak om die vlak van PH te meet
    Hoe om die kalorie-inhoud van Versus Splenda-suiker te analiseer deur pompkalorimetrieHoe om die kalorie-inhoud van Versus Splenda-suiker te analiseer deur pompkalorimetrie
    Hoe om die pH te berekenHoe om die pH te bereken
    Hoe om die massa persentasie te berekenHoe om die massa persentasie te bereken
    Hoe om die totale opgeloste vastestowwe te berekenHoe om die totale opgeloste vastestowwe te bereken
    Hoe om molêre absorpsie te berekenHoe om molêre absorpsie te bereken
    Hoe om die konsentrasie van `n oplossing te berekenHoe om die konsentrasie van `n oplossing te bereken
    » » Hoe om `n spektrofotometrie te doen
    © 2024 dmylogi.com